纯化抗体流式检测标准操作规程

2   适用范围

     适用于本公司纯化抗体流式检测的操作。

3   职责和权限
     实验员负责实施本规范，主管负责人监督执行。

4   内容

4.1 仪器装置：流式细胞仪（BDcalibur , ACEA ）、离心机。

4.2 耗材：移液枪及枪头（1ml , 100ul , 10ul）、流式上样管。

4.3 试剂：细胞株/ 外周血/骨髓、溶血素，蒸馏水，PBS，anti mouse IgG。

4.4 实验步骤

4.4.1 根据送检样本取一定数量的流式管，再做一管空白，一管同型对照，一管成品抗体对照试剂。

4.4.2 每管加入纯化抗体1ug ,加入样本（细胞或血液）50 ul, 避光孵育15min。

4.4.3 加入溶血素根据溶血素厂家操作方法使用。

4.4.4 离心 300g * 5min 弃上清。

4.4.5 用PBS洗涤一次，离心300g * 5min弃上清。

4.4.6 加入400ul PBS，混匀，上机检测。

4.5 结果分析

4.5.1 表达细胞表型是否正确；

4.5.2 表达比例和对照比例；

4.5.3 SI表达是否与对照一致